منتدى واحة الازهر


اهلا وسهلا بكم انتم من تزرعون وانتم من تحصدون
 
الرئيسيةبانوراما حول العالم البوابةمكتبة الصوربحـثواحة الازهرالتسجيلدخول

شاطر | 
 

 صباغة البكتيريا ب Gram stain

استعرض الموضوع السابق استعرض الموضوع التالي اذهب الى الأسفل 
كاتب الموضوعرسالة
أبو رامز
عضو جديد
عضو جديد


ذكر
عدد الرسائل : 15
العمر : 31
التخصص : التخصص
نقاط : 0
تاريخ التسجيل : 22/07/2008

مُساهمةموضوع: صباغة البكتيريا ب Gram stain   الجمعة أكتوبر 03, 2008 12:54 pm

صباغة البكتيريا ب Gram stain

1- [color:0d35=blue]حضر المواد اللازمة للصباغة
(distilled-water / Iodine / crystal violet / alcohol aceton solution / Safranin / normal saline / wire loop /slid / لهب بنزن / حوض للصباغة )

2- عمل مسحة بكتيرية باتباع ما يلي :
أحضر slide نظبف واكتب علية اسم المريض على طرفة ، وفي منتصف slide ضع قطرة من Normal-saline
حرق wire loop (تعقيمة) وذلك بابقائة على اللهب حتى يحمر
بجانب لهب بنزن افتح طبق بتري المحتوي على البكتيريا المطلوب صباغتها واغرس wire loop في ال Agar بمنطقة لاتحتوي على نمو بكتيري ثم ارفعة
قم باخذ 2-3 bacteria colony وضعهم على قطرة Normal-saline وامزجهم جيدا mix ستلاحظ تعكر Normal-saline
احرق wire loop مرة اخرى واعدة لمكانة واترك المسحة لتجف في الهواء
تحذير لا يجوز استخدام الحرارة لتجفيف المسحة لان ذلك يشوة الخلايا المتواجدة
اجراء عملية التثبيت Fixation للبكتيريا بواسطة لهب بنزن (الحرارة) وذلك بتمرير slide المحتوي على المسحة فوق اللهب من4 الى 5 مرات . ان هذة العملية تساعد على تغيير طبيعة الانزيمات المحللة وذلك بمنع التحلل الذاتي للبكتيريا وكذلك الحرارة تعمل على زيادة الالتصاق الخلايا بالشريحة وعدم اجراء هذة الخطوة يعني خسارة البكتيريا المتواجدة على slide مع اول غسلة لها (وطبعا تكون المسحة البكتيرية من الاعلى وليسة من جهة اللهب)

3- عملية الصباغة :
ضع slide المحتوي على المسحة البكتيرية المطلوب صباغتة على حوض الصباغة(وطبعا الجهة المحتوية على المسحة تكون للاعلى )
اولا : اغمر الشريحة بCreystal violet ذو اللون البنفسجي واتركه لمدة دقيقة واحدة ثم تشطف الشريحة slide بالماء المقطر distilled water وذلك للتخلص من الصبغة الزائدة
ثانياً: اغمر الشرحة ب iodine ذو اللون الأصفر واتركه لمدة دقيقة ثم يشطف بالماء

ثالثا: ا[b]غمر الشريحة ب alcohol acetone solution المحضر بنسبة 1:1 ذو اللون الشفاف المستخدم لاستخلاص الصبغة decolorizer وتترك لمدة 30 ثانية ثم تشطف بالماء المقطر
تحذير: إذا زادة المدة عن 30 ثانية سوف يؤدي ذلك لظهور نتائج متغايرة وتحديدا سؤدي ذلك لتحول g+ve إلى g-v
e[/b]
رابعاً:
تغمر الشريحة ب safranin ذو اللون الاحمر الغامق التي تستخدم كصبغة بديلة counter stain وتترك لمدة دقيقة ثم تشطف بالماء المقطر
جفف الشريحة المصبوغة باستخدام ال filter paper
تفحص الشريحة على العدسة الزيتية قوة تكبير 100
النتائج
تصبغ باللون البنفسجي g+ve
تصبغ باللون الاحمر g-ve
الرجوع الى أعلى الصفحة اذهب الى الأسفل
دانة الاقصي
عضو نار
عضو نار
avatar

انثى
عدد الرسائل : 263
العمر : 28
التخصص : طب مخبري
مزاجي :
نقاط : 59
تاريخ التسجيل : 02/11/2008

مُساهمةموضوع: رد: صباغة البكتيريا ب Gram stain   الثلاثاء نوفمبر 04, 2008 9:27 pm

يسلمو ابو رامز في اشياء ما فهمتها بس بنفهمنا لساتنا باول الطريق هههههههههههه


يعطيك الف عافية ما قصرت
الرجوع الى أعلى الصفحة اذهب الى الأسفل
 
صباغة البكتيريا ب Gram stain
استعرض الموضوع السابق استعرض الموضوع التالي الرجوع الى أعلى الصفحة 
صفحة 1 من اصل 1
 مواضيع مماثلة
-
» سنة ثانية ا م د بيولوجيا
» صبغة جرام Gram Stain
» طريقة صبغ البكتيريا ب Gram stain شرح + صور + فيديو
» Histoire de la microbiologie

صلاحيات هذا المنتدى:لاتستطيع الرد على المواضيع في هذا المنتدى
منتدى واحة الازهر :: أقسام كليات الجامعة :: أقسام كلية العلوم التطبيقية والطبية :: ( الـــطـــب الــمــخــبــري (MLT B.sc) )-
انتقل الى: